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共創(chuàng)共贏
左旋肉堿 (L-carnitine)，又稱L-肉堿或維生素BT，是一種促使脂肪轉化為能量的類氨基酸，可作為一種營養(yǎng)強化劑添加到食品中。2025年，國家市場監(jiān)督管理總局，國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布了GB 5009.300-2025《食品安全國家標準 食品中左旋肉堿的測定》。本標準代替GB 29989-2013《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》。
新版標準主要變化如下：擴大了方法的適用范圍，增加了第二法柱前衍生-高效液相色譜法和第三法液相色譜-串聯(lián)質譜法。其中第三法規(guī)定使用強陽離子交換色譜柱(3.0mm×50mm，5μm)或性能相當者，迪馬科技采用Diamonsil® Plus SCX(Cat.#:99458)，強陽離子交換色譜柱(3.0mm×50mm，5μm)建立了左旋肉堿的檢測方法，線性范圍10.0ng/mL-5000ng/mL，R2=0.999，滿足國標需求。
樣品制備
左旋肉堿標準工作液:分別吸取左旋肉堿標準儲備液(20mg/mL)0.005mL、0.01mL、0.25mL、1.00mL、2.00mL、2.50mL置于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻，即得。該系列標準工作液質量濃度分別為10.0μg/mL、20.0μg/mL、500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL。
左旋肉堿標準工作液(10.0μg/mL、20.0μg/mL)需臨用現(xiàn)配；左旋肉堿標準工作液(500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL)需4°C避光保存，有效期3個月。
同位素內標溶液(200μg/mL):準確稱取10mg(精確至0.1mg)左旋肉堿-d3置于10mL燒杯中，加入5mL水溶解，全部轉移至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻。將溶液轉移至棕色容器中，4°C避光保存，有效期3個月。
左旋肉堿系列標準工作液:分別吸取上述各濃度的左旋肉堿標準工作液50.0μL于微波消解罐中加入50.0μL同位素內標溶液、5mL水和2.5mL，硝酸，渦旋混勻，旋緊罐蓋，置微波消解儀中進行提取(10min升至120℃，保持40min，最大功率1000W)。冷卻后取出，緩慢打開罐蓋排氣，用水稀釋至25mL，混勻，用0.22μm微孔濾膜過濾，備用。吸取濾液0.50mL，加人乙腈0.50mL，混勻，供液相色譜-串聯(lián)質譜儀測定。該系列標準工作液質量濃度分別為10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。該系列標準工作液質量濃度分別為10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。
UPLC分析條件：
色譜柱：Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm,5μm(Cat.#:99458)
進樣量：1μL
柱溫：40℃
流動相：A-5mmol/L甲酸銨乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)
B-30mmol/L甲酸銨乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)
流速：1.0mL/min
實驗結果
圖1 左旋肉堿-d3典型譜圖
圖2 左旋肉堿典型譜圖
圖3 左旋肉堿標準曲線
小結
使用我司色譜柱Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm，5μm(Cat.#:99458)分析不同濃度左旋肉堿標準溶液（10.0ng/mL-5000ng/mL），R2 = 0.999。線性范圍良好，滿足GB 5009.300-2025國標需求。
下載方案